诱导型一氧化氮合酶基因启动子在不同细胞系中的转录活性

摘要：

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因启动子在不同细胞系中转录活性的差别.方法:利用生物信息学技术确定iNOS基因的启动子区域(iNOSp),聚合酶链反应(PCR)扩增iNOSp,克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-iNOSp报告载体;以该质粒分别转染正常人肝细胞株L02,人肝母细胞瘤细胞系HepG2,小鼠成纤维细胞NIH-3T3,人贮脂细胞(Lipocyte Ito Cell)和肝癌细胞株SMMC7721,用ELISA法检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)在不同细胞系中的表达活性.结果:成功获得iNOS基因启动子的正确克隆,克隆的iNOS启动子有顺式激活下游基因的活性.pCAT3-iNOSp瞬时转染HepG2细胞的CAT表达活性最强,肝贮脂细胞Ito中CAT表达活性最弱.结论:不同细胞中iNOS启动子的表达活性不同,其表达活性与细胞类型与细胞状态密切相关.

关键词：诱导型一氧化氮合酶、转录、聚合酶链反应、ELISA法

所属期刊栏目：13

分类号：R3(基础医学)

资助基金：中国科学院资助项目30371288;北京市自然科学基金5042024;中国博士后科学基金;中国科学院资助项目2004035045

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：460-463