10.3969/j.issn.1009-3079.2004.11.058
基因表达谱芯片技术筛选NS5ATP11反式调节基因
目的:应用基因芯片技术研究未知功能基因NS5ATP11的表达对于肝细胞基因表达谱的影响.方法:从HepG2细胞RNA中用反转录聚合酶链反应法(RTPCR)扩增出NS5ATP11编码区DNA,常规分子生物学技术构建NS5ATP11的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5ATP11,利用脂质体转染技术转染HepG2细胞,NS5ATP11的表达以Western blot杂交技术证实.从转染和非转染细胞HepG2种提取总mRNA,逆转录为cDNA,并进行基因芯片技术分析.结果:证实构建pcDNA3.1(-)-NS5ATP11在HepG2细胞中表达正确.NS5ATP11重组表达载体和空白载体转染的HepG2细胞的基因表达改变进行分析.结果表明,8种基因的表达水平上调,10种基因的表达水平下调.结论:NS5ATP11对于肝细胞基因表达谱存在一定影响;基因芯片技术是分析蛋白反式调节基因表达谱的重要技术途径,有助于了解NS5ATP11对肝细胞和其他生物学功能的调节作用.
肝细胞基因表达谱、芯片技术、筛选、反式调节、基因芯片、脂质体转染技术、表达水平、聚合酶链反应法、重组表达载体、真核表达载体、未知功能基因、生物学功能、分子生物学、转染细胞、杂交技术、技术构建、技术分析、调节作用、逆转录、反转录
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Q7(分子生物学)
国家自然科学基金C03011402,C30070689;军队科技攻关项目98D063;军队杰出人才基金N0.98H038;军队科技面上项目01MB135
2006-07-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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