短发夹RNA抑制外源荧光素酶在肝癌细胞中的表达

摘要：

目的:构建含荧光素酶(1uciferase,luc)基因的短发夹状RNA(shorr hairpin RNA,shRNA)表达质粒,并观察其在肝癌细胞Bel-7402中抑制外源荧光素酶的表达.方法:设计的两条反向重复的多聚核苷酸序列,退火形成双链DNA,再与双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-luc重组质粒,与荧光素酶基因表达质粒pCMV-luc共转染肝癌细胞株BEL-7402,检测其对荧光素酶表达的影响.结果:PCR和DNA序列分析证实了重组质粒构建成功.pshRNA-luc对共转染的pCMV-luc中的荧光素酶具有明显的抑制作用,抑制率可达86%(P＜0.01).结论:构建的pshRNA-luc表达质粒能有效地抑制荧光素酶
在肝癌细胞中的表达,为RNA干扰用于肿瘤的基因治疗打下基础.

机标关键词：短发夹状、外源、荧光素酶基因、肝癌细胞株、short hairpin RNA、表达质粒、重组质粒构建、肿瘤的基因治疗、荧光素酶表达、共转染、核苷酸序列、抑制作用、序列分析、反向重复、抑制率、双酶切、载体、退火、设计、连接

所属期刊栏目：12

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：湖北省卫生厅科研项目JX1B116

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2045-2048