幽门螺杆菌融合蛋白HspA-UreB的表达和免疫学活性

摘要：

目的:构建表达幽门螺杆菌(H pylori)融合蛋白HspA-UreB的重组表达质粒,并研究其免疫学活性.方法:定向克隆方法将郑州分离Hp菌株MEL-HP27的hspA和ureB基因融合连接入原核表达载体pET30(a),构建重组表达质粒pET-HU27.该质粒转化大肠杆菌BL21后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析融合蛋白HspA-UreB表达情况.Ni2+柱亲和层析纯化融合蛋白,与小鼠免疫血清进行Western blot分析,检测融合蛋白的免疫反应性.结果:特异PCR法与质粒酶切鉴定证实重组表达质粒pETHU27构建成功.SDS-PAGE分析显示在82.1 KDa处出现特异蛋白带,占菌体总蛋白的21%,亲和层析法获得纯度为91%的纯化融合蛋白,经免疫小鼠制备的血清可以识别该融合蛋白.结论:成功构建表达H pylori HspA-UreB融合蛋白的重组表达质粒,表达的融合蛋白具有良好的免疫反应性.

机标关键词：幽门螺杆菌、融合蛋白、免疫学、活性、Helicobacter pylori、重组表达质粒、免疫反应性、亲和层析法、构建表达、转化大肠杆菌、原核表达载体、免疫血清、小鼠、酶切鉴定、基因融合、方法、定向克隆、纯化、总蛋白、郑州

所属期刊栏目：12

分类号：R3(基础医学)

资助基金：河南省高校杰出科研创新人才工程项目2000-84;河南省科技攻关项目0424410035

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1818-1822