八宝丹通过AKT与ERK信号通路抑制乳腺癌4T1细胞增殖

摘要：

目的 探讨八宝丹(Babao Dan,BBD)通过AKT与ERK信号通路对小鼠乳腺癌(4T1)细胞增殖的影响.方法 CCK8法检测不同浓度(0.25、0.5、0.75 mg/mL)BBD干预不同时间点(24、48、72 h)的4T1细胞活力;镜下观察无血清对照组、血清组、BBD低剂量组(0.5 mg/mL)、BBD高剂量组(0.75 mg/mL)中4T1细胞的增殖变化;Western blot法检测10％胎牛血清(FBS)刺激不同时间点(0、5、15、30、60、120 min)后4T1细胞中p-AKT、p-ERK的蛋白表达水平,以确认信号通路激活的最佳时间.与此同时,将4T1细胞随机分为6组:对照组、模型组、BBD低剂量组、BBD高剂量组、U0126组(10μmol/L)和LY294002组(20μmol/L),采用Western blot法检测p-AKT、p-ERK的蛋白表达水平;最后将对数增长期的4T1细胞随机分为对照组、BBD组、U0126组(ERK信号通路抑制剂)、LY294002组(AKT信号通路抑制剂)、BBD+U0126组、BBD+LY294002组、U0126+LY294002、BBD+U0126+LY294002组8组,通过台盼蓝染色法检测以上各组干预24、48、72 h后对4T1细胞增殖的影响.结果 CCK8法结果表明,与对照组相比,不同浓度BBD干预24、48、72 h后细胞活力均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.001).镜下观察可见,与无血清对照组相比,血清组细胞形态饱满且生长迅速;与血清组相比,BBD低剂量组以及BBD高剂量组细胞生长缓慢.Western blot结果显示,与0 min比较,10％FBS干预5 min时p-ERK蛋白表达显著升高(P<0.05),同时30 min p-AKT蛋白表达明显上调并且均达到峰值(P<0.05).与对照组相比,模型组p-ERK、p-AKT蛋白表达均显著上调(P<0.05);与模型组相比,BBD低剂量组、BBD高剂量组p-ERK、p-AKT蛋白表达均显著下调(P<0.05),与U0126组和LY294002组抑制效果相当.台盼蓝染色法结果可见,与对照组相比,BBD组、U0126组以及LY294002组均可显著抑制4T1细胞增殖(P<0.001),其中BBD+U0126+LY294002组与U0126+LY294002组抑制效果相似,均可发挥显著增殖抑制作用(P<0.001),且24、48、72 h结果一致.结论 BBD可显著抑制4T1细胞增殖,其机制可能与抑制AKT与ERK信号通路表达有关.

关键词：八宝丹、乳腺癌、细胞增殖、ERK、AKT、磷酸化

所属期刊栏目：41

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：高层次人才科研项目;福建中医药大学产业横向课题

在线出版日期：2021-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1022-1030