玉竹ISSR反应体系的优化

摘要：

目的 建立稳定性高、重复性好的适合玉竹ISSR-PCR扩增的反应体系.方法 以玉竹根茎为材料,采用改良的CTAB法提取玉竹基因组DNA,并利用单因素多水平试验,分别对模板DNA、引物、Mg2+、Taq酶、dNTP的浓度和退火温度进行考察.结果 玉竹的最佳反应体系为:在20μL的反应体系中,含1×buffer、15 ng模板DNA、0.4 μmol/L引物、2 mmol/L Mg2+、1.0 U Taq酶、200 μmol/L dNTP.此反应体系以52℃的退火温度扩增出来的玉竹电泳图谱清晰,重复性好.结论 本实验反应体系适宜于玉竹ISSR-PCR的扩增,为玉竹下一步分子生物学的研究打下基础.

关键词：玉竹、简单重复序列间、反应体系优化

所属期刊栏目：28

分类号：R284.2(中药学)

资助基金：国家科技支撑项目2006BAI06A11-06

在线出版日期：2008-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：37-39