miRNA-192慢病毒表达载体构建及其抗高糖刺激氧化损伤作用

摘要：

[目的]构建miRNA-192慢病毒过表达载体,并初步评价其在糖尿病肾病中的潜在作用.[方法]检测人肾系膜细胞(HMC)中miRNA-192的含量,以判断载体过表达miRNA-192的程度.采用不同浓度高糖刺激过表达miRNA-192的HMC,检测细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,评价其过表达拮抗高糖刺激的损伤作用.[结果]酶切和DNA测序证实miRNA-192基因序列被正确克隆入pTLOX载体并能有效的包装成病毒颗粒;病毒滴度达4×107 TU/mL,实时定量RT-PCR检测显示其过表达水平相对对照载体组达376倍,证明目的基因已在转染细胞中成功表达.不同浓度高糖处理组中GSH-PX和SOD活性均比正常对照组下降(P<0.01).[结论]成功构建了miRNA-192病毒过表达载体和高滴度病毒颗粒,并能有效稳定感染HMC;过表达miRNA-192能改善高糖对GSH-PX和SOD活性的抑制作用,拮抗高糖对HMC的氧化应激损伤.

关键词：遗传载体、RNA

所属期刊栏目：29

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2012-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：807-810