发根农杆菌介导的闽楠遗传转化体系构建与优化

摘要：

闽楠[Phoebe bournei(Hemsl.)Yang]为我国重要的珍贵树种.为建立闽楠遗传转化体系,以闽楠幼苗为材料,利用pCAMBIA1300-GFP质粒转化的发根农杆菌介导植株转化.在比较注射和菌液浸泡两种侵染方式侵染效率的基础上,进一步利用正交[L9(33)]试验从菌株种类、菌液侵染浓度和侵染植株苗龄三个方面优化了遗传转化体系.另外,对不同光强影响闽楠毛状根诱导及转化率情况进行了分析.结果表明,注射法的毛状根诱导率和遗传转化率分别为80.0％、66.7％;而菌液浸泡法的诱导率和遗传转化率分别为41.2％、35.3％.正交试验中,影响闽楠毛状根诱导率和遗传转化率的主要因素为菌株种类.最大诱导率和转化效率分别达到了87.5％、70.6％.该体系的最优组合为:K599菌株在菌液浓度OD60o=1.2条件下注射侵染三叶期的闽楠幼苗.此外,较弱光强(50 μmol·m-2·s-1)的培养条件比较强光照(100νmol·m-2·s-1)更有利于闽楠幼苗的生长和遗传转化.本研究创建并优化了一套高效、稳定的闽楠遗传转化体系,成功获得了具有转基因毛状根的闽楠植株,为闽楠重要基因挖掘、新种质创建和遗传改良奠定了基础.

关键词：闽楠、遗传转化、发根农杆菌

所属期刊栏目：37

分类号：S513.035.3;S631.2;G641

资助基金：浙江省重点研发计划项目2021C02054

在线出版日期：2023-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1516-1522