黄秋葵实时荧光定量PCR内参基因的克隆与筛选评价

摘要：

为筛选黄秋葵实时荧光定量PCR的稳定内参基因,本研究以绿白1号为试验材料,根据黄秋葵RNA-seq数据库,筛选并验证获得18SrRNA、ACT、EF-1α、TUA、TUB、GAPDH等6个内参基因ORF序列;以黄秋葵不同组织、不同发育时期果实、不同发育时期叶片和低温、高温、干旱胁迫处理的叶片为材料,利用实时荧光定量PCR技术分析测定基因表达量,并结合GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件评价6个内参基因的稳定性.结果表明,6个基因在不同组织、各发育阶段及不同胁迫下均有表达,但表达稳定性不尽相同,其中,EF-1α在黄秋葵果荚发育、高温胁迫下表达稳定性最好;18SrRNA在黄秋葵各组织、叶发育和干旱胁迫下表达稳定性最优;4CT在低温胁迫下表现最稳定.此外,在29个处理中,18SrRNA、EF-1α、4CT表达均较稳定,可以用于荧光定量表达分析.本研究结果为黄秋葵基因功能分析和调控机理研究提供了基础.

关键词：黄秋葵、内参基因、胁迫、不同组织

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资助基金：福建省属公益类科研院所基本科研专项;中央引导地方科技发展专项;福建省农业科学院科技创新团队建设项目;国家大宗蔬菜产业技术体系福州综合试验站

在线出版日期：2021-02-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：60-71