桑树miR164及靶基因NAC在甘露醇和NaCl胁迫中的表达分析

摘要：

为探索miR164及靶基因在非生物胁迫响应中的分子机制,本研究以冀桑3号为试材,进行NaCl和甘露醇处理,采用生物信息学、5'-RACE及RT-qPCR技术进行分析.通过在线网站预测,发现在桑树NAC基因家族中存在3个基因(Morus012149、Morus013575与Morus006482,分别命名为CUC2、NAC100a与NAC100b)为miR164的靶基因.运用5'-RACE技术验证了3个NAC基因为miR164靶基因,其切割位点主要集中于与miRNA互补位点的第10和第11位碱基之间.使用RT-qPCR技术检测miR164及靶基因在不同组织部位的表达水平,结果表明,miR164在茎和雄花中通过调控CUC2、NAC100a和NAC100b表达发挥生物学功能.用甘露醇处理桑树幼苗,在低浓度下(150 mmol·L-1)miR164在叶片中表达量显著高于对照组,高浓度下(300 mmol·L-1)miR164表达量接近于对照组;用NaCl处理,miR164在叶片中的表达水平随着处理浓度的增大而增加.3个靶基因在不同处理不同浓度下表达水平不同.本研究结果有助于揭示桑树miR164及靶基因NAC的抗逆作用,为进一步深入研究miR164对NAC在非生物胁迫响应中的分子调控机制提供了理论依据.

关键词：桑树、非生物胁迫、miR164、NAC、RT-qPCR

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资助基金：承德医学院校级课题201720;河北省教育厅重点课题ZD2016044

在线出版日期：2018-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：856-863