核桃WRKY4基因的克隆与表达分析

摘要：

WRKY转录调控因子广泛参与植物的生长发育、生物胁迫和非生物胁迫等生理过程.本研究利用reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)及rapid amplification of cDNA ends (RACE)技术克隆了核桃(Juglans regia L.)WRKY基因cDNA全长序列,命名为WRKY4(GenBank登录号为KC795551.1).结果表明,克隆到的片段长度为2 174 bp,完整开放阅读框为1 554 bp,编码517个氨基酸.序列分析表明WRKY4基因含有2个WRKY保守结构域和2个C2H2锌指结构域,属于WRKY基因家族第1类成员.利用实时荧光定量PCR分析4℃低温和自然低温条件对该基因表达的影响以及组织表达模式.结果表明WRKY4受低温诱导表达,能够在低温胁迫的早期响应这一生理过程.WRKY4在树皮(韧皮部)、雌花、花芽和叶片中均有表达,且在树皮中表达量最高,具有组织特异性.研究结果可为核桃抗寒基因工程育种提供基因资源.

关键词：核桃、WRKY转录因子、基因克隆、实时荧光定量PCR

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资助基金：科技部科技基础平台项目“核桃、板栗资源标准化整理、整合及共享试点”2014-048,农业部保种项目“核桃、板栗种质资源繁殖更新、鉴定评价与利用”2014NWB009,山东省农业良种工程项目鲁科农字[2011]086,中俄国际科技合作专项2012DFR30700

在线出版日期：2014-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1188-1196