西马特罗多克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立

摘要：

为建立一种特异、敏感、快速、准确的西马特罗(Cimaterol,CIM)残留检测方法,成功合成其完全抗原并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立其免疫学检测方法.应用重氮化法偶联西马特罗与载体蛋白BSA、OVA,合成免疫抗原CIM-BSA和检测抗原CIM-OVA,并采用UV、SDS-PAGE、质谱3种方法进行完全抗原的鉴定.用CIM-BSA免疫新西兰大白兔制备抗西马特罗多克隆抗体并建立间接竞争ELISA检测方法.结果表明,成功合成了西马特罗完全抗原,具有合成抗原的分子特征;免疫新西兰大白兔后,成功制备了抗西马特罗多克隆抗体,其效价为1:64000,对西马特罗的半数抑制质量浓度为4.26μg/L,与特布他林、莱克多巴胺、沙丁胺醇、齐帕特罗等 β2型受体激动剂药物无交叉反应.经过条件优化,建立了西马特罗间接竞争性ELISA检测方法,其最低检测限为0.04μg/L,在0.1～12.8μg/L检测范围内,线性关系拟合度为R2=0.9771,拟合曲线方程为y=-0.2469x+0.6623.检测猪尿和饲料样品,回收率分别为96.3％～103.9％和67.0％～105.0％.综上,成功建立了具有良好应用前景的西马特罗间接竞争ELISA免疫学检测方法.

关键词：西马特罗、重氮化法、完全抗原、间接竞争ELISA、多克隆抗体、残留检测

所属期刊栏目：49

分类号：S859.84(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目;河南省科技攻关项目

在线出版日期：2020-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：157-164