牛布鲁菌与牛分枝杆菌双重PCR方法的建立及应用

摘要：

根据GenBank中已发表的流产布鲁菌种特异的omp25基因序列及牛分枝杆菌特异保守的16S rRNA加工蛋白rimM基因序列设计了2对特异性引物,通过对PCR条件的优化,建立了快速鉴别检测牛布鲁菌Brucella abortus和牛分枝杆菌Mycobacterium bovis的双重PCR方法.对建立的方法进行特异性和敏感性试验,结果显示,在牛布鲁菌和牛分枝杆菌中分别扩增出448、269 bp的特异性目的条带,作为对照的大肠杆菌Escherichia coli、沙门菌Salmonella typhimurium、八叠球菌Sarcina lutea、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、巴氏杆菌Pasteurella multocida、军团菌Legionella pneumophila、枯草杆菌Bacillus subtilis及溶血性链球菌Streptococcus pneumonia均未扩增出任何条带.牛布鲁菌和牛分枝杆菌的DNA 最低检出量均为10 pg;牛奶样品中人工污染的牛布鲁菌和牛分枝杆菌的检测敏感性分别为7.9×103 CFU/mL、3 ng/mL.

关键词：牛布鲁菌、牛分枝杆菌、双重PCR、快速鉴别检测

所属期刊栏目：31

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省动植物防疫检疫研究专项粤财农[2009]225号;国家自然科学基金-广东省自然科学基金联合项目U0631006;教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目IRT0723

在线出版日期：2010-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：100-103,107