PMA与PCR结合的细菌活细胞检测方法

摘要：

基于PCR的分子生物技术在检测过程中不能有效区分样品中细菌的死活状态,这会导致对细菌数量的错误估计.文中用叠氮溴化丙锭(PMA)对样品基因组提取进行前处理,使PMA与样品中死细胞的DNA分子共价交联,并抑制该DNA分子的PCR扩增. 结果表明:当样品中PMA质量浓度大于3μg/mL、曝光时间大于3min 时,PMA可抑制细胞膜破裂的E.coli死细胞DNA的PCR扩增;PMA质量浓度高于50μg/mL时对活细胞DNA的PCR扩增有一定影响;当浊度小于10NTU时,PMA能有效地抑制死细胞DNA的PCR扩增,而当浊度大于100NTU时,PMA失去效果.

关键词：叠氮溴化丙锭、脱氧核糖核酸、聚合酶链反应、活细胞检测

所属期刊栏目：38

分类号：Q7;Q89

资助基金：广东省农业科技攻关项目2008B021000036

在线出版日期：2010-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：142-146