大肠杆菌MalQ基因的克隆与原核融合表达

摘要：

为了构建用于表达麦芽糖转糖基酶的基因工程菌,用PCR方法获得大肠杆菌(Escherichia coli)K1 MalQ基因.将该基因插入原核表达栽体pET-DsbA中,对质粒所含外源片段进行双向测序,并经局部相似性基本查询工具(BLAST)比较分析,发现其与GenBank中报道的大肠杆菌K12 MalQ基因的同源性高达99%.重组质粒转化E.coliBL21(DE3)plysS,经异丙基硫代-β-D-半乳糖(IPTG)诱导后以融合蛋白形式表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示MalQ基因与DabA表达的融合蛋白在目标位置相对分子质量约为103000处有明显条带.经薄层层析分析粗酶液酶处理的麦芽三糖溶液,证实粗酶液具有麦芽糖转糖基活性.

关键词：麦芽糖转糖基酶、基因重组、融合表达、大环糊精、基因克隆

所属期刊栏目：36

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省科技攻关项目A301020201

在线出版日期：2008-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：122-126