重组人源性抗HBsAg单链抗体的纯化与性质鉴定

摘要：

对大肠杆菌表达的人源性抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)单链抗体(scFv)进行了纯化研究,并对单链抗体活性及其结构进行了鉴定.大肠杆菌表达的单链抗体包涵体,用8 mol/L尿素裂解,经过Ni离子螯合亲和层析和凝胶过滤两步纯化后,纯度(w)达到97%以上,再通过透析复性除去尿素.经间接ELISA和竞争性ELISA证明,复性后的scFv具有与HBsAg结合的活性,而且对鼠源抗HBsAg单克隆抗体的抑制率可达40.3%.基质辅助激光解析飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization ,MALDI-TOF-MS)的结果证明,重组的scFv分子量与理论值相符,肽质量图谱的结果证明重组单链抗体的一级结构与理论序列是完全相符的,并确定了scFv蛋白中二硫键的位置.

关键词：乙型肝炎表面抗原、单链抗体、基质辅助激光解析飞行时间质谱

所属期刊栏目：30

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省广州市科技攻关项目99-Z-010-01

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：14-18