胆固醇刺激下发状分裂相关增强子1差异表达对血管内皮细胞凋亡的影响

摘要：

目的 探索胆固醇刺激下发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split homolog 1,HES-1)差异表达对血管内皮细胞凋亡的影响.方法 应用Ea.hy926细胞构建HES-1过表达细胞和HES-1基因敲除细胞.Western blot检测造模后HES-1基因表达.选取不同浓度胆固醇(50 mmol/L、100 mmol/L和200 mmol/L)在不同时间(6 h、12 h和18 h)刺激细胞,四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)检测细胞存活率.将细胞分为4组:NC组(无胆固醇刺激)、CH组(单纯胆固醇刺激)、GO组(胆固醇刺激联合HES-1过表达)、GD组(胆固醇刺激联合 HES-1 低表达).实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain re-action,RT-qPCR)检测凋亡信号通路基因肿瘤坏死因子a(tumor necrosis factor alpha,TNF-a)、肿瘤坏死因子相关死亡结构域(tumor necrosis factor associated via death domain,TRADD)、受体相互作用蛋白 3(receptor interacting pro-tein 3,RIP3)、丝裂原活化蛋白激酶 8(mitogen-activated protein kinase 8,MAPK8)和 c-Jun 氨基末端激酶 2(c-Jun N-terminal kinase 2,JNK2)相对表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平.结果 200 mmol/L胆固醇刺激18 h后,NC、CH、GO 和 GD组细胞的存活率分别为(95.86±5.22)％、(63.85±4.91)％、(53.24±5.36)％和(72.35±5.48)％,与NC组比较,CH组、GO组和GD组细胞的存活率降低(P均＜0.05);与CH组比较,GO组细胞存活率降低,GD组细胞存活率升高,差异有统计学意义(P均＜0.05).因此,后续试验中应用200mmol/L胆固醇刺激细胞18h作为实验条件.NC组、CH 组、GO 组和 GD 组细胞凋亡率分别为(0.02±0.01)％,(41.92±4.54)％,(60.14±4.73)％和(26.71±3.58)％,与CH组相比,GO组细胞凋亡增加,GD组细胞凋亡降低(P均＜0.05).与CH组相比,GO 组TNF-α、TRADD、RIP3、MAPK8和JNK2表达升高,GD组TRADD、RIP3和JNK2表达降低,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 在胆固醇刺激下,HES-1低表达可抑制JNK凋亡信号通路激活,减弱内皮细胞凋亡.

关键词：胆固醇、发状分裂相关增强子1、凋亡、高胆固醇血症、心脑血管疾病

所属期刊栏目：37

分类号：R543.3(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：武警后勤部科研项目CWJ18L004

在线出版日期：2023-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：187-190,215