基于PI3K/Akt信号通路探讨BRCA1缺失对乳腺癌细胞放射敏感性的影响

摘要：

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路探讨乳腺癌 1 号基因(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)缺失对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)放射敏感性的影响.方法 分别使用实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和 Western blot 测定 BRCA1 在 TNBC 细胞系(MDA-MB-231、HCC-1143、BT-20、BT-549 和 HS-578T)和永生化人类乳腺上皮细胞(human mammary epithelial cell with SV40 LT/st,HM-LE)中的BRCA1 mRNA和蛋白质水平.使用转录组测序分析与BRCA1基因相互作用以促进肿瘤发生的信号通路.使用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)分析雷帕霉素处理后MDA-MB-231和si-BRCA1 MDA-MB-231的细胞毒性,并采用流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期.结果 与HMLE相比,MDA-MB-231、BT-20、BT-549和HS-578T细胞中的BRCA1 mRNA和蛋白表达显著增加(P＜0.05),并且具有高水平BRCA1的TNBC细胞对辐射具有抵抗力.HCC-1143、HS-578T、BT-20、BT-549 和 MDA-MB-231 细胞的增敏率分别为 0.75、0.66、0.57、0.62 和0.60.沉默BRCA1提高了 MDA-MB-231细胞的放射敏感性,使增敏率达到1.38.京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析显示,PI3K/Akt信号通路受上游基因BRCA1调控.沉默BRCA1显示出与PI3K/Akt/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路抑制剂(雷帕霉素)在增加放射敏感性、调节细胞周期蛋白表达和诱导TNBC细胞凋亡方面的协同作用.结论 沉默BRCA1通过减少集落形成、调节细胞周期停滞和细胞凋亡来提高TNBC细胞的放射敏感性,其作用机制与调节PI3K/Akt/mTOR信号通路相关.

关键词：磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路、乳腺癌1号基因、放射敏感性、三阴性乳腺癌

所属期刊栏目：36

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：海南省卫生健康行业科研项目20A200022

在线出版日期：2022-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：411-416,456