B7-1转基因细胞株的表达和检测

摘要：

目的 构建B7-1基因真核表达载体并导入CAK-1肾癌细胞表达,为进一步研究基因的功能做材料准备.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,以正常肝脏组织cDNA为模板,扩增B7-1基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中,将其导入CAK-1肾细胞瘤细胞,对转染后的细胞进行RT-PCR和Western blot分析.结果 克隆测序结果证实,B7-1读码框架被成功插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位点,与pCDNA3空载体转染对照细胞相比,pCDNA3-B-7载体转染的CAK-1细胞中B-7基因mRNA平和蛋白水平均有明显升高.结论 B7-1转基因细胞株的成功构建和检测,为深入研究B7-1蛋白的生物学功能奠定了材料基础.

关键词：B7-1、转基因、表达、载体

所属期刊栏目：25

分类号：R394.21

资助基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目11531223

在线出版日期：2011-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：101-103,118