不同浓度的糖对原代心肌细胞存活率的影响

摘要：

目的 探讨新生wister大鼠原代心肌细胞在不同浓度糖的培养基中细胞增殖的情况.方法 无菌条件下,取新生1～3天的wistar乳鼠心脏的心尖部三分之二的组织,采用Ⅱ型胶原酶单酶消化的方法,短时多次消化,收集消化好的细胞,采用差速贴壁的方法和化学抑制剂法去除成纤维等非心肌细胞.细胞在含10％FBS的低糖培养基中生长48～72 h后,横纹肌动蛋白鉴定心肌细胞;之后细胞换为含1％FBS的低糖培养基饥饿24 h,共分为六组,对照组合糖5.5 mmol/L,实验组合糖为20 mmol/L,33 mmol/L,40 mmol/L,50 mmol/L,60 mmol/L,分别培养24 h、48 h、72 h后,通过显微镜下观察记录心肌细胞的搏动次数,MTT检测细胞增值率.结果 细胞培养18h后已基本贴壁生长,呈现为圆形、梭型、三角形等,24 h开始出现自发性搏动,48 h后显微镜下细胞立体感十分明显,有伪足生出,形态为典型的梭型,细胞收缩有力;免疫组化鉴定细胞纯度在95％以上;细胞在不同浓度的糖作用培养20 h、48 h、72 h后心肌细胞搏动次数各不同(P＜0.05);细胞在不同浓度的高糖作用48 h后,存活率呈明显下降趋势(P＜0.05).结论 采用单一胶原酶消化法能够培养出纯度高、活力强的原代心肌细胞,且方法简便省时,可重复性高;不同高糖浓度的培养基对细胞的增殖具有抑制作用.

关键词：高糖、原代培养、心肌细胞、细胞存活率

所属期刊栏目：44

分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金;包头医学院科学研究基金项目;内蒙古自然基金项目

在线出版日期：2020-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：330-333