Livinα基因特异性shRNA在乳腺癌细胞MCF7中的表达鉴定

摘要：

目的：研究凋亡抑制因子α（ Livinα）特异的短发夹状 RNA（ shRNA）在MCF7乳腺癌细胞中对外源 Livinα基因表达的抑制作用。方法构建4组EGFP－Livinα融合表达的重组质粒，其中两组分别含shRNA 1、shRNA2对应的不同序列的cDNA干扰片断，分别电转染入MCF7乳腺癌细胞中，48h 后用荧光显微镜观察各实验组细胞中EGFP的表达，流式细胞仪检测转染后各组细胞的平均荧光强度。应用逆转录－聚合酶链反应（ RT－PCR）检测各组细胞中Livin α在RNA水平和蛋白水平的表达。结果酶切及测序证实质粒构建成功；荧光显微镜观察结果显示载体成功转染入MCF7乳腺癌细胞；干扰片段shRNA2可有效抑制目的基因mRNA的表达。结论成功构建的含目的基因有效干扰片断的质粒可抑制目的基因在MCF7乳腺癌细胞中的表达。

关键词：凋亡抑制因子α、RNA干扰、乳腺癌

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2015-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：593-597