过表达 LncRNA-MEG3对肠癌细胞 Lovo增殖活性的影响

摘要：

目的：用PCR扩增长链非编码RNA-MEG3，构建MEG3真核表达载体，将重组质粒转染人肠癌细胞Lovo，观察MEG3含量改变对Lovo细胞增殖活性的影响。方法用293细胞提取人总RNA，反转录制备cDNA，PCR扩增MEG3基因并构建克隆，阳离子脂质体法转染重组质粒至Lovo细胞，转染后48 h通过荧光标记物GFP观察细胞转染效率。 RealTime-PCR检测转染后细胞内MEG3含量变化。 CCK-8检测肿瘤细胞对数生长期基因干预对于增殖活性的影响。结果成功获取了MEG3基因并构建了重组表达载体；成功转染Lovo细胞，转染后48 h，细胞转染效率约为60％；转染后细胞内MEG3含量明显升高，与空质粒转染组比较，相对含量上升约6．8倍，差异有统计学意义（P＜0．01）；外源MEG3的高表达可抑制Lovo细胞增殖活性，基因干预后48、72 h，与未转染组及转染对照组细胞比较，差异有统计学意义（P＜0．01）。结论 LncRNA-MEG3可显著抑制Lovo细胞增殖活性。

关键词：LncRNA、Lovo、MEG3、细胞活性

分类号：R735.3(肿瘤学)

在线出版日期：2014-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：349-351,367