湖泊中军团菌的巢式PCR-MPN检测法

摘要：

为了直接检测环境水体中军团菌的存在,文章将巢式PCR与倍比稀释法相结合(巢式PCR-MPN法),采用两对引物扩增环境样品基因组DNA.将检测到含有军团菌的样品DNA模板进行十倍梯度稀释,由最低检测的稀释度,计算出样品中军团菌的细胞数,同时确定方法检测的灵敏度.并用克隆建库、构建系统树的方法来验证该文研究方法的特异性.研究结果表明,巢式PCR第二步后获得的序列均为军团菌序列,该方法军团菌DNA的检出限可以低至2.74 fg/μL.该研究建立的水体军团菌检测方法具有简便快捷、特异性好、灵敏度高的特点.

关键词：军团菌、巢式PCR-MPN法、湖泊

所属期刊栏目：34

分类号：X830.2(环境监测)

资助基金：国家重点基础研究发展规划973项目2008CB418104;中国科学院方向性项目KZCX1-YW-14-1,KZCX2-YW-JC302;江苏省人才攀登计划项目BK2009024

在线出版日期：2012-02-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：107-110