纤维素降解复合菌系中纤维结合蛋白的分离及鉴定

摘要：

采用亲和消化法分离纯化了纤维素降解复合菌系中的纤维素结合蛋白,纯化后的纤维结合蛋白液经SDS-PAGE(聚丙烯酰氨凝胶电泳)后得到13条条带(命名为CBP1～ 13),通过对其进行酶谱分析,发现低分子量的蛋白主要表现CMC(羧甲基纤维素钠)酶活性,而高分子量(66～ 200 kDa)的蛋白兼有CMC酶和木聚糖酶的活性,其中纤维结合蛋白CBP6表现出的木聚糖酶和CMC酶活性最强.这些条带经质谱鉴定后被确定由8种蛋白组成,除CBP4为Paenibacillus sp.分泌的木聚糖酶5外,其余的蛋白均由C.clariflavum DSM 19732所产生,其中CBP1～3为β-1,4木聚糖酶,CBP5,6为碳水化合物结合蛋白,CBP7～9,11,12为锚定蛋白,CBP10和CBP13为未知蛋白.通过结构域预测,发现除纤维结合蛋白CBP13外所有的蛋白均具有一种催化结构域,分别隶属于第8、9、10及48家族的糖苷水解酶,而部分蛋白(CBP1,2,4～6)还具有碳水化合物结构域或者锚定蛋白结构域(CBP5～ 12).

关键词：纤维素降解、复合菌系、亲和消化、纤维结合蛋白、鉴定

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分类号：X172(环境生物学)

资助基金：国家自然科学基金No.31260024;江西省自然科学基金No.20122BAB214012;江西农业大学大学生创新训练计划No.DC201337 Supported by the National Natural Science Foundation of China No.31260024,the Jiangxi Provincial Natural Science Foundation No.20122BAB214012 and the Students Innovation Training Program of Jiangxi Agricultural UniversityNo.DC201337

在线出版日期：2015-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1026-1031