利用唐鱼雌激素受体构建环境雌激素重组酵母测评系统的研究

摘要：

利用唐鱼雌激素受体基因片段构建重组酵母,用以筛选环境雌激素类化学物质.实验先将唐鱼雌激素受体terα基因片段插入载体pGADT7中构建表达质粒pGADT7/TERα,同时将雌激素效应元件(ere)片段插入pMP206载体中构建报告质粒pMP206/ERE-LacZ;然后把表达质粒和报告质粒共转化到酵母AH109中,经筛选成功构建了由唐鱼雌激素受体调控的表达lacZ基因的重组酵母AHpTERα/ERE.结果表明,所构建的重组酵母AHpTERα/ERE在不同浓度17β-雌二醇(E2)的诱导下,β-半乳糖苷酶的活性呈现出明显的剂量-效应关系,其EC50为(0.521±0.700) nmol·L-1.与DMSO对照组相比,重组酵母在17β-雌二醇诱导下有明显的β-半乳糖苷酶活性增强的现象.在不同浓度17α-乙炔基雌二醇(EE2)、壬基酚(NP)及其混合物、双酚A(BPA)、17β-雌二醇(E2)(阳性对照)的诱导下,重组酵母均呈现出剂量-效应关系,且灵敏度大小为E2＞EE2＞NP＞BPA.结果表明,本研究成功构建了重组基因酵母测评系统,初步判定该重组酵母可应用于环境雌激素的筛选.

关键词：唐鱼、环境雌激素、重组酵母评测系统、雌激素受体、β-半乳糖苷酶

所属期刊栏目：35

分类号：X171.5(环境生物学)

资助基金：广东省科技计划项目No.20120401 Supported by the Science and Technology Planning Project of Guangdong Province,ChinaNo.20120401

在线出版日期：2015-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：317-323