人金属硫蛋白基因(MT1E)在毕赤酵母中的表达及其铬抗性

摘要：

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类富含半胱氨酸的蛋白质,巯基含量丰富,其半胱氨酸上的巯基对重金属离子有极强的结合力,能够结合重金属形成无毒或低毒的络合物,具有重金属解毒的功能.本文根据已公布的人金属硫蛋白基因MT1E序列,用VectorNTI 7.0软件设计合成12条寡聚核苷酸片段,并拼接得到MT1E完整基因.将测序正确的MT1E基因克隆至酵母表达载体pPIC9K,酶切验证后的阳性克隆命名为pPIC9K-MT1E,含有该重组基因的毕赤酵母工程菌命名为GS115/pPIC9K-MT1E.通过酶联免疫(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法检测到GS115/pPIC9K-MT1E工程菌发酵液有金属硫蛋白酶活性,表明人金属硫蛋白MT1E基因能在毕赤酵母GS115菌株中正确分泌表达.铜(Cu)、锌(Zn)、锰(Mn)、铬(Cr)、钴(Co)重金属抗性分析表明,工程菌GS115/pPIC9K-MT1E对Cr(Ⅵ)的抗性较强,有解毒重金属Cr(Ⅵ)的能力.

关键词：人金属硫蛋白MT-1E、毕赤酵母、ELISA、重金属抗性

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分类号：X171.5(环境生物学)

资助基金：广西科学院基本科研业务费资助项目No.12YJ25SWS23;广西自然科学基金No.0020002 Supported by the Basic Scientific Research Fund of Guangxi Academy of SciencesNo.12YJ25SWS23 and the Natural Science Foundation of Guangxi ProvinceNo.0020002

在线出版日期：2014-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2724-2730