华溪蟹功能性重组金属硫蛋白的表达及抗血清制备

摘要：

采用SUMO融合表达系统表达河南华溪蟹金属硫蛋白(Metallothionein,MT),经Ni离子螯合柱分离纯化后,用SDS-PAGE、紫外光谱扫描鉴定,并对重组MT的金属结合及清除自由基能力进行了检测.同时,利用纯化的融合蛋白SUMO-MT免疫BALB/c小鼠制备抗血清,间接ELISA检测该抗血清的效价,Western blot和免疫组化染色检测其特异性.结果表明,河南华溪蟹MT以可溶形式获得表达,经金属螯合层析纯化后分析仍具有金属结合特性和清除羟自由基的生物学功能.免疫BALB/c小鼠后获得特异性的抗MT抗血清,该抗血清具有较高的效价和良好的特异性,可识别组织MT,用于免疫组化分析.

关键词：河南华溪蟹、金属硫蛋白、抗血清

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分类号：X171.5(环境生物学)

资助基金：国家自然科学基金No.30970361;高等学校博士学科点专项科研基金No.20111401110010;山西省自然科学基金No.2010011043-2Supported by the National Natural Science Foundation of China No.30970361,the Doctor Subject Foundation of the Ministry of Education of China No.20111401110010 and the Natural Science Foundation of Shanxi ProvinceNo.2010011043-2

在线出版日期：2014-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2434-2439