基于CTC-流式细胞仪活性细菌总数的快速检测技术研究

摘要：

以大肠杆菌作为研究对象,建立一种5-cyano-2,3-ditolyl tetrazolium chloride(CTC)染色结合流式细胞仪(CTC-FCM)的方法,以选择性检测水环境中具有代谢活性的细菌总数.该方法的原理是细菌与具有氧化还原性的染料CTC发生反应,形成红色荧光物质,被流式细胞仪特异性识别进而可选择性检测活性菌.研究结果表明,CTC染色的最佳反应条件为:CTC浓度为2 mmol·L-1、37℃避光孵育3h.该方法最低检测限为103个·mL-1.通过比较培养法和CTC-FCM方法检测热灭活后的大肠杆菌,结果表明CTC-FCM方法可准确区分活性菌和灭活菌,且与培养法之间具有较好的线性关系(R2=0.9465).应用CTC-FCM方法检测实际样品,结果显示该方法与培养法之间有较好的线性关系(R2=0.8121).本研究建立的CTC-FCM方法可满足饮用水水质标准需求,且检测时间比平板培养法缩短20～40 h,可以用于环境水样中活性细菌总数检测.

关键词：CTC(5-cyano-2,3-ditolyl tetrazolium chloride)染料、流式细胞仪、活性细菌总数、实际环境水样、快速检测

所属期刊栏目：33

分类号：X172;X832(环境生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目51178242;中国博士后基金项目023203010;the National Natural Science Foundation of China51178242;the National Postdoctoral Research Foundation of China023203010

在线出版日期：2013-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2511-2515