耐碱性蛋白A色谱配基的构建及性能评价

摘要：

提出了优化分子内作用力提高蛋白A(SpA)的结构域Z分子稳定性的方法,构建了突变结构域Z′和Z".圆二色光谱分析结果表明,突变结构域具有与结构域Z一致的特征峰,但突变结构域Z′中α-螺旋含量明显高于突变结构域Z".在pH 6.0下,突变结构域Z′的热转变温度(Tm)较结构域Z提高了3.9℃,而突变结构域Z"的Tm值仅提高了1.6℃.这表明,突变结构域Z′中第12位引入疏水性更大的Ile残基提高了结构域分子的稳定性.色谱介质耐碱性实验结果表明,突变结构域Z′具有更好的耐碱性,其耐碱性在突变结构域Z′四串联体融合蛋白中得到了进一步提升.研究工作为SpA色谱配基的分子改造提供了新思路.

关键词：抗体、吸附、热力学、蛋白A色谱、示差扫描量热、圆二色光谱、耐碱性

所属期刊栏目：68

分类号：TQ028.8(一般性问题)

资助基金：国家自然科学基金项目21276189, 21476166;天津市应用基础研究计划项目15JCYBJC48500;生化工程国家重点实验室开放基金2014KF-03.supported by the National Natural Science Foundation of China21276189, 21476166;the Tianjin Natural Science Foundation15JCYBJC48500;the Open Funding Project of the State Key Laboratory of Biochemical Engineering2014KF-03

在线出版日期：2017-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：3459-3465