里氏木霉QM9414尿嘧啶缺陷型转化体系改进和β-葡萄糖苷酶的过量表达

摘要：

里氏木霉是广泛应用于纤维素酶生产的工业真菌，但高产突变株遗传操作困难，限制了菌种改良。首先利用定点整合策略敲除里氏木霉突变株QM9414的pyr4基因，成功构建尿嘧啶营养缺陷型菌株QP4，其遗传转化效率显著提高，而且产酶能力不受影响。进一步在QP4中过量表达β-葡萄糖苷酶（BGL）基因bgl1，经大量平板显色筛选获得2株BGL活力明显增强的工程菌QPB4和QPB5，其酶活分别提高10.01倍和8.26倍。利用发酵酶液对2种不同预处理的玉米芯底物进行水解糖化实验，结果显示以酸处理玉米芯为底物时QPB4和QPB5的葡萄糖得率比QP4分别提高60.98%和52.44%，而以脱木素处理玉米芯为底物时其葡萄糖得率分别提高80.01%和86.00%。研究表明改进里氏木霉高产突变株遗传转化体系可以显著促进菌株改良，提高糖化应用效果。

关键词：纤维素酶、里氏木霉高产突变株、遗传转化、水解糖化、尿嘧啶营养缺陷型标记、构建和表达、生物技术、生物工程

所属期刊栏目：67

分类号：TQ812

资助基金：国家自然科学基金面上项目31370135；山东省农业科技成果转化资金项目2014No.45；山东大学基本科研业务费专项资金项目2015CJ005。@@@@supported by the National Natural Science Foundation of China31370135;the Agricultural Science and Technology Achievement Transformation Fund of Shandong Province201445;the Fundamental Research Funds of Shandong University2015CJ005

在线出版日期：2016-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2510-2518