10.16368/j.issn.1674-8999.2020.01.032
谷精草提取物对H2O2诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用
目的:探讨谷精草提取物在人晶状体上皮细胞(SRA01/04)中的抗氧化作用及其抗氧化的分子机制.方法:SRA01/04细胞培养于DMEM/F12培养基中,内含10% FBS及100 U·mL-1青霉素和100 mg·L-1链霉素,置于37℃、体积分数5% CO2饱和湿度的培养箱中培养.通过100μmol· L-1H2O2诱导制成细胞氧化损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖情况,采用Annexin V/PI法检测凋亡情况,采用EHSA检测谷胱甘肽(glutathione,GSH),采用定量PCR和免疫印迹法检测Keap1、Nrf2 mRNA和蛋白的表达.结果:谷精草提取物处理后SRA01/04细胞生长情况明显改善,比单纯H2 O2损伤后存活率高22% (P <0.01);谷精草提取物处理组的SRA01/04细胞凋亡比例较单纯H2O2损伤组下降约10%.同时,在谷精草提取物处理的SRA01/04细胞中可以检测到GSH升高,且呈浓度依赖性.在100 mg·L-1谷精草提取物处理后,SRA01/04细胞中KEAP1蛋白表达降低、Nrf2蛋白表达升高,其各自的mRNA表达分别降低了2.28倍、升高了3.56倍.结论:谷精草提取物在SRA01/04细胞中具有明显的抗氧化作用,可降低细胞凋亡,诱导细胞内GSH的增多,其机制可能与调节Keap1-Nrf2信号通路有关.
谷精草、人晶状体上皮细胞、抗氧化、谷胱甘肽、Keap1、Nrf2、细胞增殖、细胞凋亡
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R285.5(中药学)
浙江省丽水市科技计划项目2015sjzc20
2020-04-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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