猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的真核表达质粒的构建及表达分析

摘要：

根据GenBank中的参考序列设计并合成引物序列,从pMDM13h中扩增带酶切位点和His-tag的基因序列;用HindⅢ和Xho Ⅰ双酶切PCR扩增产物和pcDNA3.0栽体,连接构建真核表达重组质粒Pc3M13h,利用PCR,双酶切和测序鉴定其正确性;重组质粒pe3M13h转染COS-7细胞,瞬时表达的转染细胞(96孔板)在转染36～48 h后,应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学,分别检测pc3M13h在COS-7细胞培养上清液和细胞内的表达.结果表明,设计合成的引物成功扩增了带有酶切位点和His-tag的基因序列;成功构建了真核表达重组质粒pe3M13,双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学检测显示,pc3M13h重组质粒不但能够在COS-7细胞中进行表达,而且能够进行微量的分泌表达.

关键词：猪囊尾蚴、排泄分泌抗原、基因表达

所属期刊栏目：43

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"863"计划项目2003AA249030

在线出版日期：2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：168-172