一种新型双荧光素酶报告基因表达载体的构建

摘要：

目的:构建一种新型的双荧光素酶报告基因表达载体.方法:设计并扩增海肾荧光素酶基因hRLUC,将其插入到双酶切的含有萤火虫荧光素酶报告基因(Firefly)的载体pGI4.10中,得到pGL4.10-hRLUC;使用lipofectamine3000将pGL4.10和pGL4.10-hRLUC分别转染入HEK293细胞,检测细胞中荧光素酶活性,以未转染细胞作对照.结果:使用PCR方法获得hRLUC表达单元(2 350 bp);双荧光素酶报告基因表达载体pGL4.10-hRLUC经酶切和测序鉴定,插入正确.转染pGL4.10组荧光素酶活性相对值为(220.311 ±2.082);转染pGL4.10-hRLUC的细胞中荧光素酶活性低于pGI4.10转染细胞,高于未转染细胞(P＜0.05).结论:成功构建了双荧光素酶报告基因(hRLUC和Firefly)表达载体.

关键词：荧光素酶报告基因、表达载体、hRLUC

所属期刊栏目：53

分类号：R965.1(药理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81503677;河南省青年骨干教师资助项目2015GGJS-095;河南省科技厅基础与前沿项目152300410110

在线出版日期：2018-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：38-41