10.3969/j.issn.1671-6825.2006.04.003
人食管癌Eca-109细胞膜肿瘤抗原的筛选
目的:从人食管癌Eca-109细胞入手,筛选出食管癌高效细胞膜肿瘤抗原的大致范围.方法:采用敏感的序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)来确定Eca-109细胞人主要组织相容性复合体(HLA)基因分型,用HLA血清学分型技术筛选健康志愿者;改良的Neville法结合超滤法纯化膜蛋白并分组:<3000、3000~10000、<10000、10000~30000、30000~100000、>100000、总膜蛋白共7个组,各组抗原负载树突状细胞(DC),以DC激活的T淋巴细胞为效应细胞,Eca-109细胞为靶细胞,设效靶比为8:1、16:1、32:1,用MTT法检测效应细胞杀伤率.结果:Eca-109细胞HLA的基因分型为A*03,A*24;B*35,B*37;DRB1*01,DRB1*12;DR52;DRB3;筛选到1例表型为A03杂合子的健康志愿者.根据MTT检测,在效靶比为8:1、16:1和32:1时,膜蛋白相对分子质量小于10 000组的肿瘤细胞杀伤率与未使用去垢剂的总膜蛋白组相比差异无统计学意义(P>0.05),而相对分子质量小于3 000组的杀伤率最高,与各组相比差异均有统计学意义(P<0.05).结论:Eca-109细胞膜蛋白中存在能引起特异性的抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞免疫反应的肿瘤抗原,相对分子质量小于3 000的膜蛋白成分中可能存在人食管癌的高效肿瘤抗原.
食管癌、肿瘤抗原、HLA、膜蛋白、树突状细胞
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R730.51(肿瘤学)
河南省科技攻关项目324410035
2006-08-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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