10.3969/j.issn.1002-7386.2014.18.001
靶向 Akt1基因 RNA 干扰对胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响
目的:构建兔Akt1短发卡RNA( shRNA)真核表达载体,探讨靶向Akt1基因RNA干扰对兔胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法经预实验挑选2条有效短发卡RNA转染入原代培养日本大耳白兔胸主动脉平滑肌细胞内,设置空白对照组( A组)、阴性对照组( B组)、Akt1-shRNA-1组( C组)、Akt1-shRna-2组( D组)。48、72 h荧光显微镜下观察细胞转染效率,分别在转染平滑肌细胞后24、48、72、96 h使用流式细胞仪和TUNEL法检测凋亡细胞数目。结果平滑肌细胞48 h转染效率为17櫃.8%;流式细胞仪测定C组和D组在48 h凋亡率分别为19.72%和15.43%,抑制增值效果达到最高峰,与A、B组比较,差异有统计学意义( P <0.05)。 TUNEL法测定结果表明,C、D组细胞凋亡水平与A、B组比较明显增多( P <0.05),且以C组较为明显。结论成功构建了2条兔Akt1 shRNA真核表达载体,可有效地抑制平滑肌细胞增殖。
载体构建、Akt1、再狭窄、shRNA
R543.12(心脏、血管(循环系)疾病)
2014-09-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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