咪达唑仑调节YAP/TAZ信号通路对骨肉瘤细胞增殖凋亡和侵袭的影响

摘要：

目的:探究咪达唑仑(MDZ)调节 Yes 相关蛋白(YAP)/PDZ 结合基序转录共激活因子(TAZ)信号通路对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法:qRT-PCR、Western blot 检测人正常成骨细胞系、OS细胞系YAP、TAZ mRNA 和蛋白的表达,筛选最佳干预细胞系;以不同浓度的 MDZ(0、12.5、25、50、100、200μmoL/L)干预OS细胞,MTT 法检测细胞增殖活性,筛选最佳干预浓度;将 OS细胞随机分成control组、MDZ组、pcDNA3.1 组、pcDNA3.1-YAP/TAZ 组,qRT-PCR 法检测转染效率;EdU染色、流式细胞仪和Transwell小室分别检测细胞增殖、凋亡和侵袭;Western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2 相关 X 蛋白(Bax)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及YAP、TAZ蛋白表达;构建 OS 裸鼠模型,分为对照组和 MDZ 组,免疫组化法检测移植瘤组织 Ki-67、YAP、TAZ蛋白表达,TUNEL染色检测凋亡.结果:OS细胞系中YAP、TAZ mRNA 及蛋白表达水平显著升高(P<0.05);MDZ显著降低PCNA、N-cadherin、YAP、TAZ 表达,抑制 MG63、U20S 细胞增殖和侵袭,升高Bax、E-cadherin表达,促进细胞凋亡.过表达 YAP/TAZ 可逆转 MDZ 对 MG63、U20S 细胞增殖和侵袭的抑制作用,对MG63、U20S细胞凋亡的促进作用(P<0.05);体内实验表明,MDZ显著降低移植瘤质量、体积及 Ki-67、YAP、TAZ 表达水平,促进移植瘤细胞凋亡(P<0.05).结论:MDZ 可能通过抑制YAP/TAZ信号通路,抑制OS细胞增殖和侵袭,促进凋亡.

关键词：咪达唑仑、YAP/TAZ、骨肉瘤、增殖、凋亡、侵袭

所属期刊栏目：30

分类号：R738.1;R373;R587.1

资助基金：湖北省卫生健康委科研项目WJ2023F090

在线出版日期：2024-02-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8