牛circMYH8的鉴定及其调控牛肌原代细胞增殖的功能探究

摘要：

旨在鉴定牛circMYH8 以及探究其对牛肌原代细胞增殖的调控作用.设计合成circMYH8 的divergent prim-er及convergent primer 2 组引物,分别以牛背最长肌cDNA、RNase R处理的牛背最长肌cDNA以及牛背最长肌gDNA为模板进行PCR扩增,通过测序及琼脂糖凝胶电泳进行环状RNA鉴定;对circMYH8 进行不同发育时期骨骼肌RT-qPCR分析、核质分离试验以及RNase R耐受性试验;构建及合成circMYH8 的过表达载体及干扰片段,并转染至牛肌原代细胞中,通过RT-qPCR、Western Blot、EdU、流式细胞术等手段探究了circMYH8 对牛肌原代细胞增殖表型的影响.结果表明,测序及琼脂糖凝胶电泳证实circMYH8 为环状RNA;RT-qPCR分析显示,circMYH8 在牛骨骼肌发育早期高表达,核质分离试验结果显示,circMYH8 在细胞核和细胞质中都有表达,RNase R耐受性试验表明,circMYH8 的稳定性高于其线性转录物;过表达circMYH8 抑制了增殖标志基因的表达,EdU活性降低,而抑制circMYH8 促进了增殖标志基因的表达,EdU活性上升,S期细胞比例上升.结果表明,牛circMYH8 能显著抑制牛肌原代细胞增殖.

关键词：牛circMYH8、骨骼肌、细胞增殖

所属期刊栏目：38

分类号：S823(家畜)

资助基金：西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目;青海省科技计划项目;国家肉牛牦牛产业技术体系项目;国家自然科学基金;四川省科技计划项目

在线出版日期：2023-09-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：197-204