烟草ERF基因NtRAP2-7的表达载体构建及表达模式分析
为了研究烟草NtRAP2-7基因在非生物胁迫响应中的功能,采用同源克隆的方法,在烟草品种K326中克隆到1个ERF转录因子基因NtRAP2-7.并利用生物信息学软件分析了该基因编码蛋白的理化性质、空间结构与系统进化关系.序列分析结果表明,该基因序列全长1398 bp,共编码465个氨基酸残基,预测蛋白的分子量为51.16 ku.该蛋白包含一个由3个β-折叠及1个α-螺旋组成的保守结构,并含有58个磷酸化位点.亚细胞定位预测表明,该蛋白主要定位于细胞核,并包含单分型的核定位信号序列.进化分析表明,NtRAP2-7蛋白与林烟草RAP2-7蛋白序列同源性最高,为98%.运用qRT-PCR技术进行了该基因的表达模式分析,组织表达分析发现,NtRAP2-7基因在烟草根、茎、叶、花中均有表达,但在根中的表达量最高.该基因的表达在低钾、高盐、干旱、ABA、H2 O2处理下受到诱导和在低温处理下受到抑制,结果表明,烟草NtRAP2-7基因参与了烟草的非生物胁迫应答反应.并利用双酶切法成功构建了pBI121-NtRAP2-7过表达载体,为今后该基因在非生物胁迫下的功能研究奠定了基础.
烟草、NtRAP2-7基因、基因表达、非生物胁迫
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Q78;S572.03(基因工程(遗传工程))
植物生理学与生物化学国家重点实验室开放课题SKLPPBKF 1505,SKLPPBKF 1506
2018-11-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
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