绣球 SSR-PCR 反应体系的建立与优化

摘要：

为了建立适合绣球的 SSR-PCR 反应体系，采用正交设计 L25（56）对影响 SSR-PCR 反应体系的5个主要因素（Mg2＋、dNTPs、引物、DNA 模板和 Taq 聚合酶）在5个水平上进行优化，筛选出每个因素的最佳水平，建立适合绣球的SSR-PCR 反应体系。结果表明，20μL 的 SSR-PCR 反应体系中，DNA 模板用量为60 ng，Mg2＋浓度为1．5 mmol ／L， dNTPs 浓度为0．3 mmol ／L，引物浓度为0．4μmol ／L，Taq 聚合酶用量为0．8 U。扩增程序为：94℃预变性5 min；94℃变性1 min，最佳温度退火40 s，72℃1 min，33个循环；72℃延伸10 min，4℃保存。选用10个绣球品种对建立的SSR-PCR 反应体系进行验证，结果表明该体系具有较好的稳定性和通用性。建立和优化的绣球 SSR-PCR 反应体系，为应用 SSR 分子标记技术开展绣球属植物遗传育种研究提供了理论依据和技术参考。

关键词：绣球、SSR-PCR、正交设计、反应体系

所属期刊栏目：31

分类号：S68.03(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：江苏省科技支撑计划项目BE2014408；江苏省农科院成果转化与推广项目KF155005

在线出版日期：2016-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：68-73