柑橘叶点霉菌 ISSR－PCR 反应体系的优化

摘要：

为了获得最优柑橘黑斑病病原菌柑橘叶点霉菌 ISSR－PCR 反应体系，利用单因素试验法对反应体系中的5个因素（Mg2＋、dNTP、引物、Taq DNA 聚合酶和模板 DNA）分别设置了不同的浓度梯度进行反应体系的优化。结果表明，在20μL 反应体系中，含有1．5 mmol／L 的 Mg 2＋、0．15 mmol／L 的 dNTP、0．3μmol／L 的引物、25 ng DNA 模板、0．5 U Taq DNA 聚合酶为最优。利用优化的 ISSR－PCR 反应体系对不同地理来源的21株柑橘叶点霉菌菌株进行扩增。结果表明，已建立的体系稳定可靠。柑橘叶点霉菌 ISSR－PCR 反应体系的建立为利用 ISSR 分子标记技术对柑橘叶点霉菌进行遗传分析奠定了基础。

关键词：柑橘叶点霉菌、ISSR、单因素试验法、柑橘黑斑病

分类号：S435.79(病虫害及其防治)

资助基金：国家现代农业柑橘产业技术体系建设专项资金CARS－27

在线出版日期：2016-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：123-127