菜用大黄 SRAP-PCR 反应体系的优化及验证

摘要：

为建立菜用大黄最佳的SRAP反应体系，进一步对菜用大黄品种进行遗传多样性分析，以菜用大黄基因组DNA为模板，采用单因素与正交设计相结合的方法，对SRAP-PCR扩增体系中的模板DNA、Mg2＋、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶浓度5个因素进行优化，并确立菜用大黄SRAP-PCR的最佳体系。结果表明：菜用大黄各因素对反应体系影响大小依次为：引物浓度＞Mg2＋浓度＞dNTPs浓度＞Taq DNA聚合酶浓度＞DNA用量；最佳反应体系为：25μL反应体系中含10×PCR Buffer 2．50μL、模板DNA 30 ng、Mg2＋2．50 mmol/L、dNTPs 0．25 mmol/L、Taq DNA聚合酶0．04 U/μL、上下游引物各0．5μmol/L。用8个菜用大黄品种DNA样品对优化的反应体系进行验证，均获得了条带清晰且多态性较好的扩增图谱，证实了该体系的稳定性和可靠性，可用于菜用大黄的遗传多样性分析。

关键词：菜用大黄、SRAP-PCR、体系优化

分类号：S644.9

资助基金：河南省科技厅基础前沿项目122300410134

在线出版日期：2014-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：105-110