粟弯孢霉叶斑病菌G蛋白β亚基基因克隆及表达

摘要：

旨在获得粟弯孢霉叶斑病菌G蛋白β亚基基因，明确其表达模式，为阐明该基因对粟弯孢霉叶斑病菌致病性的调控机制奠定基础。运用SMART RACE RT-PCR技术，克隆粟弯孢霉叶斑病菌G蛋白β亚基基因ClGβ全长cD-NA序列，以qRT-PCR技术，对该基因在粟弯孢霉叶斑病菌不同生长时间的表达特征进行分析。结果表明，ClGβ基因cDNA编码区为1056 bp，DNA包含4个内含子和5个外显子，编码351个氨基酸。该基因的cDNA序列在GenBank中注册的登录号为JQ768316。 qRT-PCR结果表明，Gβ基因在菌株生长过程中表现出前期表达量较低而后期表达量明显升高的趋势。构建了pET28（a）-ClGβ原核表达载体，经IPTG诱导，目的蛋白在宿主菌E．coli BL21中获得表达，表达产物分子量与ClGβ蛋白计算分子量一致。

关键词：粟弯孢病菌、G蛋白β亚基、qRT-PCR、原核表达

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：谷子产业技术体系项目CARS-07-12．5-A8；国家自然科学基金项目31271787；31301616

在线出版日期：2014-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：7-12