上西早生柿ETR5基因片段的克隆与植物表达载体的构建
从上西早生(Uenishiwase)柿叶片中,提取了基因组DNA.以基因组DNA为模板,经PCR扩增,克隆到一个549 bp的ETR5的DNA片段.序列分析表明,上西早生柿基因与洋梨ETR5的核苷酸同源性为79.0%,氨基酸同源性为81.0%;并且含有其他植物ETR5的保守氨基酸区和不变氨基酸残基,表明克隆到的序列是上西早生柿ETR5的基因片段.设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase片段.2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断.连接片断经双酶切消化后,连接到植物表达载体pBI221上,构建成Uenishiwase-ETR5基因的植物表达载体.
柿、上西早生、乙烯受体、ETR5、植物表达载体
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S665.203(果树园艺)
河北省自然科学基金C2006000465
2007-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
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