期刊专题

10.13210/j.cnki.jhmu.20221206.002

Mnk1对脂多糖诱导的巨噬细胞炎症反应的影响

引用
目的:探究丝裂原活化蛋白激酶相互作用丝苏氨酸激酶1(Mnk1)基因缺失对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(Mφ)炎症反应的影响及可能机制.方法:选取8~10周龄健康雄性野生型C57BL/6J(WT)、Mnk1基因敲除(KO)小鼠,分为WT+PBS组、KO+PBS组、WT+LPS组、KO+LPS组,腹腔注射PBS或LPS 24 h后,ELISA法检测血清中IL-1β含量,提取脾脏Mφ行qRT-PCR检测脾脏Mφ中IL-1β和Sprouty2(Spry2)的mRNA表达水平.同时分别提取两种品系的小鼠腹腔Mφ进行体外实验,检测巨噬细胞黏附功能,并以等体积LPS或PBS溶液刺激24 h,分为WT+PBS组、KO+PBS组、WT+LPS组、KO+LPS组,并用表达Spry2的腺病毒转染各组Mφ,qRT-PCR法检测Mφ中LFA-1α、IL-1β、iNOS、CD206、Arg1和Spry2的mRNA表达水平,Western blot法检测Mφ中Mnk1、ERK1/2、P-ERK1/2、P-p38、P-JNK、Spry2蛋白水平.结果:在体实验中,腹腔注射LPS的KO+LPS组小鼠较WT+LPS组血清中IL-1β的浓度升高更为显著.与WT+LPS组比较,KO+LPS组脾MφIL-1β的表达水平更高,Spry2的mRNA表达水平下降.体外实验中,与WT+LPS组比较,KO+LPS组IL-1β、iNOS的mRNA表达水平升高,CD206、Arg1、Spry2的mRNA表达水平下降;LFA-1α的表达在WT+PBS和WT+LPS组无明显差异,而KO+LPS组LFA-1α的表达水平较WT+LPS组显著上升.巨噬细胞黏附功能检测结果显示,KO组Mφ的黏附率在多个时间点较WT组均增高.LPS刺激后,Mnk1 KO组的MφSpry2表达较WT下降,而P-ERK1/2表达较WT组升高.Mφ转染过表达Spry2的腺病毒并用LPS刺激后,KO+AdSpry2组MφSpry2表达上升,P-ERK1/2表达较KO+AdGFP组明显下降.结论:Mnk1基因敲除可增强LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,其机制可能与Mnk1的底物Spry2参与调控巨噬细胞功能相关.

Mnk1、巨噬细胞、炎症、Sprouty2

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R364.5(病理学)

国家重点研发计划;湖北省卫生健康委员会科研项目

2023-03-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

246-252

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海南医学院学报

1007-1237

46-1049/R

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2023,29(4)

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