过表达Cx32对肝细胞癌细胞Huh7增殖、迁移、侵袭能力的影响及其机制

摘要：

目的:揭示缝隙连接蛋白32(connexin 32,Cx32)对肝细胞癌(heptocellular carcinoma,HCC)细胞Huh7增殖、迁移、侵袭的影响及其机制.方法:首先,利用生物信息学技术分析Cx32在癌组织与正常肝组织中的表达差异及其与HCC重要临床病理特征之间的关系;其次,在细胞水平检测Cx32的表达在4种HCC细胞株与正常肝脏上皮细胞株中的差异,构建稳定过表达Cx32的Huh7细胞株,并采用MTT法、细胞划痕实验和Transwell实验检测过表达Cx32对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;最后,使用蛋白质免疫印迹法(western blot)和免疫荧光法(immunofluorescence,IF)检测上皮 ?间质转化(epithelial?mesenchymal transition,EMT)标志物表达水平的变化.结果:生信分析显示,相较于正常肝组织,Cx32 mRNA和蛋白质表达水平在HCC组织中降低,且mRNA表达水平随着HCC患者T分期、组织学分级及临床分期的进展而降低(P＜0.05).细胞实验结果示,Cx32蛋白表达在不同HCC细胞株中均呈现一定程度的下调;其中,经慢病毒感染介导Cx32稳定高表达的Huh7细胞(Cx32 OE)与空白对照(Control)组和(或)阴性对照(NC)组细胞相比,OD490值、划痕愈合率及侵袭细胞数均更低(P＜0.05).Cx32 OE组的E?cadherin蛋白表达水平上调,而Snail和Vimentin蛋白表达水平下调.结论:Cx32在HCC组织和细胞中均低表达,而Huh7细胞的增殖、迁移和侵袭能力可被过表达的Cx32抑制,Cx32这一效应可能与其对EMT过程的抑制有关.

关键词：肝细胞癌、缝隙连接蛋白32、增殖、迁移、侵袭、上皮-间质转化

所属期刊栏目：29

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;安徽省高校优秀青年人才支持计划项目;蚌埠医学院512人才培育计划项目

在线出版日期：2023-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：115-122