10.13210/j.cnki.jhmu.20220530.001
刺槐素对鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞NLRC4炎症小体活化的影响
目的:研究刺槐素(Acacetin)对鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞Nod样受体家族蛋白4(the nod-like receptor family card domaincontaining protein 4,NLRC4)活化的影响.方法:将小鼠骨髓巨噬细胞分为对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+鞭毛蛋白组及LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组,对照组加入完全培养基,LPS组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h,LPS+鞭毛蛋白组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h后加入鞭毛蛋白(10μmol/L)刺激0.5 h;LPS+刺槐素+鞭毛蛋白组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h后再加入Acacetin(10μmol/L)处理0.5 h,最后加入鞭毛蛋白(10μmol/L)刺激0.5 h;采用WB检测细胞裂解液Pro-caspase-1和Pro-IL-1β的表达,上清液中caspase-1和IL-1β的蛋白表达;ELISA法检测上清液中IL-1β、IL-18和TNF-α的含量,LDH检测试剂盒检测细胞上清液中LDH的活性.结果:与对照组相比,LPS+鞭毛蛋白组细胞上清液中caspase-1、IL-1β蛋白表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05),细胞裂解液中Pro-caspase-1、Pro-IL-1β蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);与LPS+鞭毛蛋白组比较,LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组细胞上清液caspase-1、IL-1β蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),细胞裂解液中Pro-caspase-1、Pro-IL-1β蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05).ELISA结果显示,与对照组相比,LPS+鞭毛蛋白组细胞上清液中IL-1β、IL-18、TNF-α水平及LDH活性明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与LPS+鞭毛蛋白组比较,LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组细胞上清液IL-1β释放水平明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05),IL-18、TNF-α的水平及LDH的活性降低,但差异无统计学意义(P>0.05).结论:刺槐素可有效抑制鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞NLRC4炎症小体的活化,减少细胞损伤.
刺槐素、鞭毛蛋白、NLRC4、活化、巨噬细胞
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R285.5(中药学)
新疆维吾尔自治区自然科学基金;新疆维吾尔自治区优秀青年科技人才培养项目;新疆维吾尔自治区人民医院院内项目
2022-09-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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