右归饮对糖皮质激素诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的调节作用

摘要：

目的:探讨右归饮对糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)凋亡的调控作用及机制.方法:将20只SD大鼠分为生理盐水组和右归饮组,每组10只,分别采用生理盐水及右归饮灌胃,每日一次.灌胃2周后,脱脊处死大鼠并取血,制备空白血清和含药血清,提取、培养大鼠BMSCs并进行分组给药:空白组(10％空白血清)、模型组(10％空白血清+地塞米松5×10?5mol/mL)、中药组(10％含药血清+地塞米松5×10?5mol/mL)、对照组(10％含药血清),分别用CCK-8法检测各组细胞增殖变化,ELISA法测定各组骨碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平,茜素红染色比较各组红染钙矿化结节数量,Western blot检测BMSCs凋亡相关蛋白表达,并对量丰成分进行分子对接,根据结合能评价靶点与活性化合物的结合强度与活性.结果:对比各组不同时间点的吸光度(A450)比值,模型组较空白组均降低(P<0.05),而中药组、对照组较模型组均提高(P<0.05),对照组与空白组差异无统计学意义(P>0.05);ELISA结果表明模型组ALP水平显著低于空白组和对照组(P<0.05),中药组显著提高ALP水平(P<0.05),对照组与空白组差异无统计学意义(P>0.05);此外,模型组与各组相比钙矿化结节数目显著降低,对照组与空白组差异无统计学意义,两组均高于模型组与中药组;Western blot结果表明与空白组相比,模型组促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase 3的表达水平均显著升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平显著降低(P<0.01),中药组的结果则与之相反,对照组与空白组的表达无明显差异;分子对接结果表明右归饮主要通过epicatechin 5,7,3'-trimethyl ether、delphinin等调控BMSCs的凋亡,促进成骨分化.结论:右归饮含药血清可通过对Bax、cleaved caspase 3、Bcl-2的调控,保护GCs诱导的BMSCs凋亡,促进BMSCs增殖与成骨分化.

关键词：右归饮;骨髓间充质干细胞;凋亡;靶点蛋白;分子对接

所属期刊栏目：27

分类号：R285(中药学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目;国家自然科学基金青年基金;江苏省卫生健康委科研项目

在线出版日期：2022-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1852-1858