乌梅总黄酮对MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制

摘要：

目的:研究乌梅总黄酮(Fructus mume,FMF)对1-甲基-4苯基吡啶离子(MPP+)诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的修复作用,同时探讨其可能机制.方法:采用体外细胞培养的方法,MPP+诱导损伤建立SH-SY5Y细胞模型,将细胞分为5组:正常对照组、模型组(250μmol/L MPP+)、FMF低(MPP++FMF 10μmol/L)、中(MPP++FMF 50μmol/L)和高(MPP++FMF 100μmol/L)剂量组.药物作用于细胞72 h后,用4,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)染色法观察细胞凋亡的形态学改变,Annexin-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测线粒体膜电位,蛋白质印迹法(Western Blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达水平.结果:DAPI染色显示,MPP+诱导损伤的SH-SY5Y细胞大部分胞质浓缩,细胞核体积缩小,呈典型的凋亡特征性形态;经FMF作用72 h后,细胞凋亡形态呈不同程度改善,细胞凋亡数量减少.与正常对照组相比,模型组细胞凋亡率、线粒体膜电位(ΔΨm)、Bax、Caspase-3蛋白表达水平均明显增高(P均<0.01);Bcl-2蛋白的表达水平及Bcl-2/Bax比值均显著下降(P均<0.01).与模型组相比,FMF(10、50、100μmol/L)组SH-SY5Y细胞凋亡率显著降低(P均<0.01),ΔΨm有下降的趋势,中、高剂量组和模型组比较,差异有统计学意义(P均<0.01);FMF(10、50、100μmol/L)Bcl-2蛋白均有升高的趋势,中、高剂量组和模型组比较,差异有统计学意义(P均<0.01);FMF低、中、高剂量组Bax、Caspase-3蛋白显著降低(P均<0.01),Bcl-2/Bax比值显著升高(P均<0.01).说明FMF能下调Bax、Caspase-3水平和升高Bcl-2/Bax比值,抑制MPP+诱导的细胞凋亡.结论:FMF通过调控线粒体凋亡途径中相关蛋白表达进而改善MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤,发挥神经保护作用.

关键词：帕金森病、乌梅总黄酮、1-甲基-4苯基吡啶离子、SH-SY5Y细胞、细胞凋亡

所属期刊栏目：27

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金项目;广西卫生厅立项项目;广西中医药管理局立项项目

在线出版日期：2021-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：494-499