10.13210/j.cnki.jhmu.20190920.002
MiR-34a介导mTOR/4E-BPmir信号通路对食管癌细胞凋亡作用机制研究
目的:探究MiR-34a介导mTOR/4E-BP1信号通路对食管癌细胞凋亡作用机制研究.方法:在ATCC细胞库购买食管癌细胞株,随机分为3组,第一组,miR-34a组(miR-34a组):通过转染方法将miR-34a mimics转染到食管癌细胞中;第二组,食管癌组(EC组):单纯食管癌细胞株不做其他处理,正常培养;第三组,空转组(ID组):将miR-34a阴性对照转染到食管癌细胞株中.通过qRT-PCR法 、TUNEL法 、cck-8法 、Westernblot法检测食管癌细胞中miR-34a mRNA的表达含量 、凋亡情况 、增殖情况 、mTOR/4E-BP1的蛋白含量的差异性来探究MiR-34a介导mTOR/4E-BP1信号通路对食管癌细胞凋亡作用机制研究.结果:qRT-PCR检测结果显示,EC组食管癌细胞内的miR-34a mRNA表达量最低,miR-34a组食管癌细胞内的miR-34a mRNA表达量最高,miR-34a组与ID组 、EC组相比较miR-34a mRNA含量显著上升,说明转染成功(P<0.05).TUNEL检测结果显示EC组食管癌细胞凋亡数量最少,miR-34a组食管癌细胞大量凋亡,miR-34a组与EC组 、ID组相比较细胞凋亡率显著升高(P<0.05),EC组与ID组细胞凋亡无显著差异.ID组 、EC组细胞增殖OD值比miR-34a组高,组间比较具有明显差异(P<0.05),EC组食管癌细胞的增殖数量最多,miR-34a组食管癌细胞的增殖数量最少,ID组食管癌细胞的增殖情况比EC组相比无明显差异(P>0.05).通过Western blot法,对EC组 、ID组 、miR-34a组食管癌细胞内的mTOR/4E-BP1蛋白进行免疫印迹,灰度显示,EC组的mTOR/4E-BP1蛋白含量最高,EC组与ID组相比较,蛋白含量相近,无显著性(P>0.05),miR-34a组蛋白含量最低,miR-34a组和EC组 、ID组相比较,食管癌细胞中蛋白含量降低(P<0.05).结论:MiR-34a可能通过抑制mTOR/4E-BP1信号通路的表达来促进食管癌细胞的凋亡.
MiR-34a、mTOR/4E-BP1、食管癌、凋亡、机制
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R735.1(肿瘤学)
国家青年科学基金项目8180140119
2019-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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