期刊专题

10.13210/j.cnki.jhmu.20190923.001

补肾活血方联合富血小板血浆对脂肪间充质干细胞增殖活性和功能表达的影响

引用
目的:探讨补肾活血方联合富血小板血浆对共培养体系中脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖活性和功能表达的影响.方法:取手术患者皮下脂肪组织及退变髓核组织,采用多次酶消化法原代分离 、培养ADSCs及NPCs,建立细胞共培养体系.纳入腰椎间盘退变患者,连续服用补肾活血方2周,分别于初次服药前和末次服药后1 h抽取静脉血,采用二次离心法制备富血小板血浆,以不同血浆干预培养,实验共分为5组:富血小板血浆组(PRP)、贫血小板血浆组(PPP)、含药富血小板血浆组(M-PRP)和含药贫血小板血浆组(M-PPP)、胎牛血清组(FBS).倒置显微镜下观察共培养体系中细胞的形态变化;采用M T T法分别在干预24、48 h及72 h检测细胞增殖率;一周后采用甲苯胺蓝染色检测蛋白聚糖表达情况;两周后采用RT-PCR法检测细胞COL2A1、ACAN、SOX9基因表达水平.结果:本研究经原代消化分离 、共培养体系中获得的细胞胞质体积略增大,形态由长梭形逐渐转变为短梭形或多角形为主,折光性较好.采用M T T法检测发现,与FBS组相比,PRP组及M-PRP组细胞增殖率显著提高(P<0.05).甲苯胺蓝染色结果显示,M-PRP组 、M-PPP组及PRP组细胞的数量及阳性染色率均明显高于PPP组和FBS组,其中M-PRP组的作用最显著.RT-PCR结果显示,与FBS组相比,PRP组和M-PRP组COL2A1 mRNA表达显著上调(P<0.05),其余组无明显变化(P>0.05);PRP组ACAN mR-NA表达显著上调(P<0.05);PRP组和M-PRP组SOX9 mRNA表达量维持不变(P>0.05).结论:补肾活血方联合富血小板血浆可以提高共培养体系中ADSCs细胞增殖活性,上调COL2A1、ACAN、SOX9的mRNA表达,促进成软骨分化,为椎间盘退变的治疗提供了新方向.

补肾活血方、富血小板血浆、脂肪间充质干细胞、增殖活性、功能表达

25

R681.5(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))

中央本级重大增减支项目"名贵中药资源可持续利用能力建设项目".2060302;国家自然科学基金资助项目.81674005 , 81904230 ,81804120 ,81302992;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助ZZ10 - 015;北京市自然科学基金资助项目. 7164313;中国博士后科学基金.2017M611125 ,.2016M591364

2019-11-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

1521-1525,1531

暂无封面信息
查看本期封面目录

海南医学院学报

1007-1237

46-1049/R

25

2019,25(20)

专业内容知识聚合服务平台

国家重点研发计划“现代服务业共性关键技术研发及应用示范”重点专项“4.8专业内容知识聚合服务技术研发与创新服务示范”

国家重点研发计划资助 课题编号:2019YFB1406304
National Key R&D Program of China Grant No. 2019YFB1406304

©天津万方数据有限公司 津ICP备20003920号-1

信息网络传播视听节目许可证 许可证号:0108284

网络出版服务许可证:(总)网出证(京)字096号

违法和不良信息举报电话:4000115888    举报邮箱:problem@wanfangdata.com.cn

举报专区:https://www.12377.cn/

客服邮箱:op@wanfangdata.com.cn